Ihe ndị na-ekpebi nrụpụta DNA njikọ

N'ime ụdị DNA, RNA na njikọ nucleic asịd na-abụghị nke okike, nzọụkwụ Nchekwa na Njikọ na-arụ ọrụ dị oke mkpa.

Nzọụkwụ Deprotection bụ iwepụ otu DMT na nkwado siri ike ma ọ bụ 5' hydroxyl otu na nucleoside gara aga na organic acid, ma kpughee ìgwè hydroxyl maka nzọụkwụ njikọ na-esote.A na-ejikarị trichloroacetic acid 3% dị na dichloromethane ma ọ bụ toluene mee ihe nkwụdo.Ntinye nke trichloroacetic acid na oge nkwụsị (oge nkwụsị) na-achịkwa ịdị ọcha nke ngwaahịa ikpeazụ.Nleta dị ala na oge nkwụsị nke ezughi oke na-ahapụ otu DMT na-adịghị emeghachi omume, na-ebelata mkpụrụ ma na-abawanye adịghị ọcha na-achọghị.Ogologo oge nkwụsịtụ nwere ike iduga depurine nke usoro nhazi, na-emepụta adịghị ọcha na-atụghị anya ya.

Nzọụkwụ Njikọ na-enwe mmetụta maka ọdịnaya mmiri nke ihe mgbaze na mmiri dị na ikuku.Ntụle nke mmiri na njikọ kwesịrị ịbụ ihe na-erughị 40 ppm, dị mma karịa 25 ppm.Iji mee ka ọnọdụ anhydrous synthesis, njikọ nke nucleic acid kwesịrị ka a rụọ ya na mpaghara iru mmiri dị ala, yabụ anyị na-akwado ndị ahịa anyị ka ha jiri ya.Ngwa Amidites agbazere, nke nwere ike igbari Phosphoramite ntụ ntụ ma ọ bụ mmanu mmanu n'ime acetonitrile anhydrous iji zere kọntaktị na ikuku.

Ihe ndị na-ekpebi nrụpụta DNA njikọ5
Ihe ndị na-ekpebi nrụpụta DNA njikọ4

Ebe ọ bụ na igbari nke phosphoramidites ọ ka mma na-abụghị mmiri ọnọdụ, na molekụla ọnyà ka adsorb na Chọpụta mmiri na reagents na amidite, ọ dị mkpa iji dozieỌnyà molekụla.Anyị na-akwado 2 g subsieve maka 50-250ml karama reagent, 5g maka 250-500ml reagent karama, 10g maka 500-1000ml reagent karama, na 20g maka 1000-2000ml reagent karama.

Ekwesịrị ime mgbaze nke phosphoramidites n'okpuru ikuku inert, na nnọchi nke activator reagents na acetonitrile kwesịrị imecha n'oge.The Capping na Oxidation reagents kwesịrị iji ngwa ngwa o kwere omume, ndị meghere reagents na-enye obere shelf ndụ, na obere ọrụ n'oge njikọ.


Oge nzipu: Ọgọst-09-2022